肿瘤转移的临床检测进展
肿瘤转移的临床检测进展
发布时间： 2003-10-15 作者：谢志坚综述 吴求亮审校
肿瘤转移是恶性肿瘤最基本的生物学特征，是一系列具有内在联系的多个步骤
相互作用的结果，最早是Liotta提出的粘附、降解、移动学说，每个步骤也是有多
个因素的共同参与，因而其具有复杂性。它是目前肿瘤患者死亡的主要原因。当前
确定肿瘤转移主要是依据常规病理切片的结果，但有些患者虽进行了根治手术，且
常规病理切片淋巴结无转移，但随后仍出现肿瘤转移。所以单纯根据常规病理切片
来进行预后的判断往往欠科学，因此急需发展新的手段来检测肿瘤的转移。近年来
随着免疫学与分子生物学的发展，为更敏感地检测到淋巴道、血道中转移的肿瘤细
胞提供可能，本文对该领域的研究进展作一综述。
1 常规病理学方法
淋巴结转移的检测通常是HE染色，但敏感性较低，一般为104～105个正常细胞
中能检出一个肿瘤细胞，连续切片检测能增加结果的稳定性，最早对淋巴结的微小
转移灶的检测方法是连续切片法，有作者对400例乳腺癌常规切片阴性的淋巴结进
行连续切片检测，检出率为13%。Wilkinson和Fisher的研究表明连续切片检测可使
检出率提高14%～24%。但由于该法工作量大且有较高的假阴性，所以难以推广应用
。
2 免疫组织化学方法
2.1 粘附分子
肿瘤要产生转移必须先从原发灶脱落，然后游走至血管、淋巴管，与之产生粘
附并进入管腔才能产生转移，而粘附分子在其中起着重要作用。粘附分子有许多种
类，与肿瘤的转移有关的研究主要集中在上皮粘附素(E?cadherin)和CD44这两个
因子上。
2.1.1 上皮粘附素
E?cadherin是一种钙依赖性的具有使细胞之间产生粘附功能的糖蛋白，是产
生细胞连接的分子基础。有研究表明许多肿瘤如乳腺癌、结肠癌、胃癌、膀胱癌均
可出现E?cadherin的减少，E?cadherin的减少使肿瘤细胞之间的粘附力降低，肿
瘤细胞容易脱落而出现转移。因此E?cadherin被看作抑制肿瘤转移的因素［1］。
Hunt［2］的研究表明，对于较小的乳腺肿瘤，E?cadherin的表达与淋巴转移具有
相关性，认为E?cadherin的减低是肿瘤转移过程中的早期事件。
2.1.2 CD44
另一个粘附分子CD44主要参与细胞与基质间的粘附，且参与细胞的伪足形成，
与细胞的迁移有关［3］。许多研究表明，CD44基因的表达与肿瘤的转移具有显著
相关性，尤其CD44v与细胞骨架的相互作用在肿瘤的发展与转移中起着重要作用［
4］。且CD44v6阳性患者的预后显著较差，经多因素分析认为CD44v6是独立于肿瘤
分期、淋巴结状态的预后指标［5］。
2.1.3 其他粘附分子
其他的粘附分子有整合素族与选择素族。整合素族为细胞表面的糖蛋白受体，
是由α、β亚单位通过非共价键连接的异二聚体，可以与纤粘蛋白、层粘蛋白、胶
粘蛋白等结合，参与细胞与基质的粘附。有研究表明，恶性肿瘤细胞间粘附力降低
、侵袭力增加与整合素受体表达下降有关，Gui的研究对正常、良性、恶性乳腺组
织的整合素受体表达水平进行了比较，发现恶性肿瘤的整合素受体表达明显下降，
多因素分析结果表明β?1、α?1、α?v亚属可作为乳腺癌腋淋巴结转移的重要
指标。选择素族有P、E、L三种亚型，有研究表明E?选择素在乳腺癌的转移中起着
重要作用［6］。
2.2 自分泌运动因子及受体
自分泌运动因子(AMF)是一种分子量为55KD?66KD的热溶蛋白质，它是一个家
族，通过与受体(AMFR)作用而刺激细胞运动，AMFR是一个分子量为78KD的糖蛋白，
研究证实AMF受体gp78的表达直接与肿瘤的转移能力有关，人癌标本中的gp78表达
与临床病理特征和病人预后有关。Maruyama［7］的研究表明101例食道癌中有55例
gp78表达阳性，它的表达与肿瘤生长方式、肿瘤大小有关，且淋巴结有转移者gp7
8表达率较高，说明与AMFR相关的肿瘤细胞运动促进了肿瘤的生长与转移。有淋巴
转移的大肠癌其gp78表达率明显增高，gp78阳性患者的5年生存率明显低于阴性者
［8］。
3 多聚酶联反应(PCR)方法
近年来，在这方面的研究取得了长足的进展，多采用RT?PCR法扩增外周血、
骨髓或淋巴结在正常情况下不表达的组织或肿瘤特异性mRNA，其敏感性为1×106。
因为mRNA在细胞外很不稳定，所以一旦在组织或体液中检测到特异性mRNA就意味着
有肿瘤细胞转移，且有些肿瘤尽管有RNA表达但无蛋白表达，因此RT?PCR法比蛋白
测定具有更高敏感性。
3.1 前列腺特异性抗原mRNA
有研究者对前列腺癌的微转移进行了研究，检测了前列腺癌患者外周血、骨髓
或淋巴结中前列腺特异性抗原(PSA)表达，结果表明：在确定有转移的患者外周血
中PSA的检出率为40%，显著高于无转移的10%。且具有良好的特异性［9，10］。
3.2 细胞角蛋白mRNA
细胞角蛋白(CK)是一个多基因家族，主要在上皮细胞表达，CKs有20多个不同
亚类构成，主要有CK8、CK19、CK20等，由于CK8、CK19能在正常人外周血中表达，
而CK20不在外周血中表达，所以CK20可作为有些肿瘤如乳腺癌、膀胱癌和大肠癌的
血道转移指标［11］。Soeth用巢式RT?PCR监测了57例大肠癌患者的骨髓CK20mRN
A表达，阳性率为65%［12］。CK19作为乳腺癌淋巴结的转移指标也取得了较好的结
果，
19mRNA为阳性，表示有微小转移［13］。CK是目前检测肿瘤微转移使用较多的一个
指标。特别是检测食道癌与头颈鳞癌的淋巴转移方面，得到大家的认可。
3.3 酪氨酸酶mRNA
酪氨酸酶是黑色素细胞合成黑色素的关键酶，在正常情况下黑色素细胞不会出
现在外周血，所以一旦在外周血检出酪氨酸酶可提示有血道转移。Wang［14］对2
9例黑色素瘤患者的区域 《肿瘤转移的临床检测进展》
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发布时间： 2003-10-15 作者：谢志坚综述 吴求亮审校
肿瘤转移是恶性肿瘤最基本的生物学特征，是一系列具有内在联系的多个步骤
相互作用的结果，最早是Liotta提出的粘附、降解、移动学说，每个步骤也是有多
个因素的共同参与，因而其具有复杂性。它是目前肿瘤患者死亡的主要原因。当前
确定肿瘤转移主要是依据常规病理切片的结果，但有些患者虽进行了根治手术，且
常规病理切片淋巴结无转移，但随后仍出现肿瘤转移。所以单纯根据常规病理切片
来进行预后的判断往往欠科学，因此急需发展新的手段来检测肿瘤的转移。近年来
随着免疫学与分子生物学的发展，为更敏感地检测到淋巴道、血道中转移的肿瘤细
胞提供可能，本文对该领域的研究进展作一综述。
1 常规病理学方法
淋巴结转移的检测通常是HE染色，但敏感性较低，一般为104～105个正常细胞
中能检出一个肿瘤细胞，连续切片检测能增加结果的稳定性，最早对淋巴结的微小
转移灶的检测方法是连续切片法，有作者对400例乳腺癌常规切片阴性的淋巴结进
行连续切片检测，检出率为13%。Wilkinson和Fisher的研究表明连续切片检测可使
检出率提高14%～24%。但由于该法工作量大且有较高的假阴性，所以难以推广应用
。
2 免疫组织化学方法
2.1 粘附分子
肿瘤要产生转移必须先从原发灶脱落，然后游走至血管、淋巴管，与之产生粘
附并进入管腔才能产生转移，而粘附分子在其中起着重要作用。粘附分子有许多种
类，与肿瘤的转移有关的研究主要集中在上皮粘附素(E?cadherin)和CD44这两个
因子上。
2.1.1 上皮粘附素
E?cadherin是一种钙依赖性的具有使细胞之间产生粘附功能的糖蛋白，是产
生细胞连接的分子基础。有研究表明许多肿瘤如乳腺癌、结肠癌、胃癌、膀胱癌均
可出现E?cadherin的减少，E?cadherin的减少使肿瘤细胞之间的粘附力降低，肿
瘤细胞容易脱落而出现转移。因此E?cadherin被看作抑制肿瘤转移的因素［1］。
Hunt［2］的研究表明，对于较小的乳腺肿瘤，E?cadherin的表达与淋巴转移具有
相关性，认为E?cadherin的减低是肿瘤转移过程中的早期事件。
2.1.2 CD44
另一个粘附分子CD44主要参与细胞与基质间的粘附，且参与细胞的伪足形成，
与细胞的迁移有关［3］。许多研究表明，CD44基因的表达与肿瘤的转移具有显著
相关性，尤其CD44v与细胞骨架的相互作用在肿瘤的发展与转移中起着重要作用［
4］。且CD44v6阳性患者的预后显著较差，经多因素分析认为CD44v6是独立于肿瘤
分期、淋巴结状态的预后指标［5］。
2.1.3 其他粘附分子
其他的粘附分子有整合素族与选择素族。整合素族为细胞表面的糖蛋白受体，
是由α、β亚单位通过非共价键连接的异二聚体，可以与纤粘蛋白、层粘蛋白、胶
粘蛋白等结合，参与细胞与基质的粘附。有研究表明，恶性肿瘤细胞间粘附力降低
、侵袭力增加与整合素受体表达下降有关，Gui的研究对正常、良性、恶性乳腺组
织的整合素受体表达水平进行了比较，发现恶性肿瘤的整合素受体表达明显下降，
多因素分析结果表明β?1、α?1、α?v亚属可作为乳腺癌腋淋巴结转移的重要
指标。选择素族有P、E、L三种亚型，有研究表明E?选择素在乳腺癌的转移中起着
重要作用［6］。
2.2 自分泌运动因子及受体
自分泌运动因子(AMF)是一种分子量为55KD?66KD的热溶蛋白质，它是一个家
族，通过与受体(AMFR)作用而刺激细胞运动，AMFR是一个分子量为78KD的糖蛋白，
研究证实AMF受体gp78的表达直接与肿瘤的转移能力有关，人癌标本中的gp78表达
与临床病理特征和病人预后有关。Maruyama［7］的研究表明101例食道癌中有55例
gp78表达阳性，它的表达与肿瘤生长方式、肿瘤大小有关，且淋巴结有转移者gp7
8表达率较高，说明与AMFR相关的肿瘤细胞运动促进了肿瘤的生长与转移。有淋巴
转移的大肠癌其gp78表达率明显增高，gp78阳性患者的5年生存率明显低于阴性者
［8］。
3 多聚酶联反应(PCR)方法
近年来，在这方面的研究取得了长足的进展，多采用RT?PCR法扩增外周血、
骨髓或淋巴结在正常情况下不表达的组织或肿瘤特异性mRNA，其敏感性为1×106。
因为mRNA在细胞外很不稳定，所以一旦在组织或体液中检测到特异性mRNA就意味着
有肿瘤细胞转移，且有些肿瘤尽管有RNA表达但无蛋白表达，因此RT?PCR法比蛋白
测定具有更高敏感性。
3.1 前列腺特异性抗原mRNA
有研究者对前列腺癌的微转移进行了研究，检测了前列腺癌患者外周血、骨髓
或淋巴结中前列腺特异性抗原(PSA)表达，结果表明：在确定有转移的患者外周血
中PSA的检出率为40%，显著高于无转移的10%。且具有良好的特异性［9，10］。
3.2 细胞角蛋白mRNA
细胞角蛋白(CK)是一个多基因家族，主要在上皮细胞表达，CKs有20多个不同
亚类构成，主要有CK8、CK19、CK20等，由于CK8、CK19能在正常人外周血中表达，
而CK20不在外周血中表达，所以CK20可作为有些肿瘤如乳腺癌、膀胱癌和大肠癌的
血道转移指标［11］。Soeth用巢式RT?PCR监测了57例大肠癌患者的骨髓CK20mRN
A表达，阳性率为65%［12］。CK19作为乳腺癌淋巴结的转移指标也取得了较好的结
果，
10个常规切片阳性的淋巴结CK19mRNA也为阳性，而53个阴性淋巴结中有5个CK
19mRNA为阳性，表示有微小转移［13］。CK是目前检测肿瘤微转移使用较多的一个
指标。特别是检测食道癌与头颈鳞癌的淋巴转移方面，得到大家的认可。
3.3 酪氨酸酶mRNA
酪氨酸酶是黑色素细胞合成黑色素的关键酶，在正常情况下黑色素细胞不会出
现在外周血，所以一旦在外周血检出酪氨酸酶可提示有血道转移。Wang［14］对2
9例黑色素瘤患者的区域 《肿瘤转移的临床检测进展》
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